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线虫幼虫培养法
幼虫培养既是一种检出率高的人群调查手段,又是鉴别虫种的有效办法,因而较多地用于美洲钩虫、十二指肠钩虫、粪类圆线虫、毛圆线虫等幼虫的鉴别。最常用而简便的方法是试管滤纸培养法。
【材料】试管(1.5×10cm,或稍大规格也可);滤纸剪成宽度略大于试管直径、长度略短于试管的纸条;蒸馏水或凉开水;竹签、温箱等。
【操作步骤】①试管内加入蒸馏水2ml;将滤纸条纵折后摊平,挑取粪便约0.5g涂在滤纸条的中段;将涂有粪样的滤纸条直插入试管,使与水接触,但不能没及有粪部分。②放入28℃(25~30℃)温箱中培养5~6天或31℃温箱中培养4天后,取出试管,沿管壁加入45℃温水,使淹没涂有粪样的滤纸部分。③1小时后,取出滤纸弃去,再静置1小时,倾去管中上清液,吸取沉渣部分镜检。
【注意事项】①在开始的24小时内如发现培养管中的水因被粪便污染而显混浊时,可用吸管吸出,重新沿管壁加入蒸馏水。②培养期间须每天检查管内水分,如发现水量过少则随时加水,防止干燥。③检查时如因幼虫过于活跃,妨碍观察,可置玻片于90℃热水上以热气熏,或加入1滴3~5%的福尔马林或稀碘液(1:4000)以制动。
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