厚涂片法
目前常用的是加藤法,用于检查蠕虫卵。为了作虫卵计数以进行定量调查,世界卫生组织推荐使用改良加藤法(又称Kato-Katz厚涂片法)。
【试剂与材料】①配制透明液用蒸馏水100ml,加甘油100ml,再加3%孔雀绿溶液1ml。②亲水性玻璃纸,厚40μm,裁成26×30mm大小,在上述甘油透明液中浸泡24小时以上即可使用;③尼龙绢片(100目/时)或铜丝网片(80~100目/时)约5×5cm大小;④塑料定量板或一定规格的硬纸板厚1.37mm,当中有一直径为6.0mm的圆孔,容积为38.72mm,可容纳粪便41.67mg,中国目前采用的定量板为椭圆形孔,系由一个长方形和两个半圆形合成。椭圆孔的长径为7.9mm,短径为4mm,板厚为1.37mm,容积为38.59mm。圆孔板与椭圆形孔板两者容积相近似。⑤塑料刮片。
【操作步骤】①将尼龙绢置于待检粪样上,用塑料片在其上轻刮,使细粪渣透过绢孔至刮片上。②将定量板放在载玻片中部,然后把刮片上的细粪渣填入定量板的中央孔内,使填满全孔并抹平。③小心移去定量板,使粪样留在玻片上。④将浸有透明液的亲水玻璃纸盖在粪样上,用橡皮塞或玻片轻压使粪便均匀地展开于玻璃纸下。⑤室温25℃、湿度75%时,经半小时后镜检并计数全片虫卵。
【注意事项】①粪渣透明的速度取决于温、湿度,一般放置室温即可,冬天则需置温箱以加快透明。②薄壳虫卵(如钩虫卵等)容易因透明过度而漏检,因此宜在制片后0.5~1小时即行检查。③各地生产的定量板可能规格不一,为取得准确的虫卵计数,先需核定孔中的粪便量。如每片数得某种蠕虫卵数为A,孔中粪量为Bmg,则换算为每克粪便虫卵数(EPG)为:A×1000/B。当粪量为41.6mg时,则简化为A×24即可。
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